xmlns=»http://www.rsc.org/schema/rscart38″>la membrana celular se compone de una red de glicoconjugados que incluye glicoproteínas y glicolípidos que presenta una matriz densa de carbohidratos que desempeñan funciones críticas en muchos procesos biológicos. La tecnología basada en lectina se ha utilizado ampliamente para caracterizar glicoconjugados en tejidos y líneas celulares., Sin embargo, su especificidad hacia su supuesto ligando glicano y sensibilidad in situ han sido tecnológicamente difíciles de estudiar. Además, debido a que reconocen principalmente los glicanos, las dianas de glicoproteína subyacentes generalmente no se conocen. En este estudio, empleamos el etiquetado oxidativo de proximidad de lectina (lectina PROXL) para identificar las glicoproteínas de superficie celular que contienen glicanos que son reconocidos por las lectinas. Las lectinas comúnmente utilizadas se modificaron con una sonda para producir radicales de hidróxido en la proximidad de las lectinas etiquetadas., Los polipéptidos subyacentes de las glicoproteínas reconocidas por las lectinas se oxidan e identifican por el flujo de trabajo proteómico estándar. Como resultado, aproximadamente el 70% de las glicoproteínas identificadas fueron oxidadas in situ por todas las sondas de lectina, mientras que solo el 5% de las proteínas totales fueron oxidadas. La correlación entre los glicositos y los sitios de oxidación demostró la efectividad de las sondas de lectina. La especificidad y la sensibilidad de cada lectina se determinaron utilizando información de glicanos de sitio específico obtenida a través de análisis glucómicos y glicoproteómicos., En particular, las lectinas de unión al ácido siálico y las lectinas de unión a la fucosa tuvieron mayor especificidad y sensibilidad en comparación con otras lectinas, mientras que las que fueron específicas para glicanos con manosa alta tienen poca sensibilidad y especificidad. Este método ofrece una visión sin precedentes de las interacciones de lectinas con glicoproteínas específicas, así como las redes de proteínas que están mediadas por tipos específicos de glicanos en las membranas celulares.
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