la microscopie électronique (EM) est une technique permettant d’obtenir des images à haute résolution d’échantillons biologiques et non biologiques. Il est utilisé dans la recherche biomédicale pour étudier la structure détaillée des tissus, des cellules, des organites et des complexes macromoléculaires. La haute résolution des images EM résulte de l’utilisation d’électrons (qui ont des longueurs d’onde très courtes) comme source de rayonnement éclairant. La microscopie électronique est utilisée en conjonction avec une variété de techniques auxiliaires (par exemple, coupe mince, immuno-étiquetage, coloration négative) pour répondre à des questions spécifiques. Les images EM fournissent des informations clés sur la base structurelle de la fonction cellulaire et de la maladie cellulaire.
Il existe deux principaux types de microscope électronique: le EM de transmission (TEM) et le EM de balayage (SEM). Le microscope électronique à transmission est utilisé pour visualiser des échantillons minces (sections de tissu, molécules, etc.) à travers lesquels les électrons peuvent passer générant une image de projection. Le TEM est analogue à bien des égards au microscope optique conventionnel (composé)., TEM est utilisé, entre autres, pour l’image de l’intérieur des cellules (en sections minces), la structure des molécules de protéines (contrastées par l’ombrage métallique), l’organisation des molécules dans les virus et les filaments cytosquelettiques (préparés par la technique de coloration négative), et la disposition des molécules de protéines dans les membranes cellulaires (par gel-fracture).
Classiques de microscopie électronique à balayage dépend de l’émission d’électrons secondaires à partir de la surface d’un échantillon., En raison de sa grande profondeur de mise au point, un microscope électronique à balayage est L’analogue EM d’un microscope optique stéréo. Il fournit des images détaillées des surfaces des cellules et des organismes entiers qui ne sont pas possibles par TEM. Il peut également être utilisé pour le comptage des particules et la détermination de la taille, et pour le contrôle des processus. On l’appelle un microscope électronique à balayage parce que l’image est formée en balayant un faisceau d’électrons focalisé sur la surface de l’échantillon dans un motif raster., L’interaction du faisceau d’électrons primaires avec les atomes proches de la surface provoque l’émission de particules à chaque point de la trame (par exemple, des électrons secondaires de basse énergie, des électrons de rétrodiffusion de haute énergie, des rayons X et même des photons). Ceux-ci peuvent être collectés avec une variété de détecteurs, et leur nombre relatif traduit en luminosité à chaque point équivalent sur un tube cathodique. Étant donné que la taille de la trame au niveau du spécimen est beaucoup plus petite que l’écran de visualisation du tube cathodique, l’image finale est une image agrandie du spécimen., Des SEMs convenablement équipés (avec des détecteurs secondaires, de rétrodiffusion et de rayons X) peuvent être utilisés pour étudier la topographie et la composition atomique des échantillons, ainsi que, par exemple, la distribution en surface des immuno-étiquettes.
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