Azione antibatterica. Un certo numero di rapporti sono stati pubblicati citando miele come avere azione antibatterica in vitro contro una vasta gamma di specie di batteri e funghi.13 Tuttavia, in molti di questi studi, la concentrazione minima inibitoria (MIC) del miele non è stata determinata e la concentrazione di miele utilizzata era abbastanza alta che l’inibizione della crescita microbica avrebbe potuto essere dovuta all’effetto osmotico del miele., Inoltre, in molti degli studi, in cui sono stati riportati i valori MIC per il miele, il tipo di miele utilizzato era stato scelto arbitrariamente, ma è ben noto che la potenza antibatterica può variare di 100 volte tra i diversi mieli.14

letteratura segnalazione valori MIC per il miele con un livello standardizzato di attività antibatterica è stato completamente rivisto da Molan15 e, in questi studi, i mieli usati sono stati selezionati e hanno attività antibatterica vicino al livello medio, per lo più a un livello equivalente allo standard di riferimento antisettico fenolo ad una concentrazione del 13% al 18% (peso/volume)., Miele utilizzato nella maggior parte dei prodotti registrati con gli Stati Uniti Food and Drug Administration (FDA) per la cura delle ferite è in genere standardizzato per essere equivalente al 12% al 16% fenolo. I vari studi condotti con questi standard mieli riportati valori MIC per una vasta gamma di specie di batteri presenti nelle ferite infette: S. aureus, vari Stafilococchi coagulasi-negativi, varie specie di Streptococchi, varie specie di Enterococchi, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, e una gamma di anaerobi.,

In tutti i casi, i valori MIC sono risultati inferiori all ‘ 11%, il che significa che anche quando il miele è fortemente diluito dall’essudato della ferita, avrà ancora più che sufficiente potenza di attività antibatterica per inibire la crescita dei batteri. I vari ceppi di Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA) e di enterococchi resistenti alla vancomicina (VRE) testati sono risultati sensibili all’attività antibatterica del miele quanto i ceppi non resistenti di tali specie., Non incluso nella recensione di Molan15,ma coperto da George e Cutting, 16 era uno studio su 130 isolati clinici di batteri gram-negativi multiresistenti per determinare la loro sensibilità a un miele standardizzato (potenza antibatterica equivalente al 18% di fenolo).Sono stati riportati 16 valori minimi di concentrazione inibitoria del 6-8% di miele per Acinetobacter baumannii (inclusi 5 ceppi pan-resistenti), per VRE e per ceppi produttori di beta-lattamasi a spettro esteso (ESBL) di Escherichia coli, Klebsiella e Enterobacter. I valori MIC per gli isolati di P., aeruginosa erano 12% a 14% miele.

C’è stata qualche preoccupazione che la resistenza al miele possa svilupparsi nei batteri esposti ad esso attraverso la cura delle ferite. Tuttavia, in esperimenti di “allenamento di resistenza” a lungo termine con 4 specie di batteri che infettano la ferita, non è stata possibile creare una diminuzione permanente della suscettibilità al miele e non è stato possibile rilevare mutanti resistenti al miele.17 Si è concluso che il rischio che i batteri acquisiscano resistenza al miele è basso finché le alte concentrazioni di miele sono mantenute clinicamente., In uno studio simile condotto dai ricercatori dell’esposizione a concentrazioni subletali di antibiotici tetraciclina, oxacillina, e ciprofloxacilin rapidamente indotta da un fenotipo resistente antibiotici sensibili ceppi di S. aureus, P. aeruginosa, ma costante esposizione di tali organismi, aumentando concentrazioni subletali di miele potrebbe non aumentare il livello di resistenza passato l’iniziale MIC del miele.18

I mieli non solo mostrano variazioni nella potenza della loro attività antibatterica, ma anche nella natura di esso., Nella maggior parte dei mieli del mondo, l’attività antibatterica oltre a quella dovuta all’osmolarità e all’acidità del miele è dovuta al perossido di idrogeno.13 Questo agente antibatterico è generato dalla glucosio ossidasi, un enzima che le api aggiungono al nettare raccolto immagazzinato nei favi. L’enzima è inattivo sotto il basso livello di acqua libera presente nel miele, ma diventa attivo se il miele si diluisce, come con l’essudato della ferita.,19 Sebbene il miele diluito al 25% con acqua possa ancora esibire un’attività antibatterica equivalente a quella di una soluzione all ‘ 8% di fenolo nei test di laboratorio, sarà molto meno attivo in uno scenario di ferita perché il siero e il tessuto della ferita contengono l’enzima catalasi che rompe rapidamente il perossido di idrogeno. Qualsiasi attività antibatterica visibile osservata con la soluzione al 25% di miele testata in laboratorio verrebbe rimossa se il sangue ad una concentrazione dell ‘ 1% viene aggiunto alle piastre di agar.,

Il miele degli alberi di manuka (e di alcuni altri membri del genere Leptospermum) ha un tipo unico di attività antibatterica non dovuta al perossido di idrogeno e, in quanto tale, non è influenzato dall’attività dell’enzima catalasi nelle ferite. La sua attività antibatterica è dovuta al metilgloxale, che si forma per conversione spontanea nel miele maturo dalla sua sostanza precursore diidrossiacetone che si trova nel nettare di manuka.,20 Methylglyoxal da solo è una sostanza citotossica ed è stata sollevata la possibilità che il methylglyoxal nel miele di manuka possa contribuire a ritardare la guarigione delle ferite nei pazienti con diabete.21 Sembrerebbe, tuttavia, che la combinazione e il rapporto con altri componenti del miele di manuka impediscano al componente metilgliossale di presentare tale tossicità, poiché nei test richiesti per la registrazione FDA dei prodotti per la cura delle ferite al miele di manuka non si riscontra alcuna citotossicità., Inoltre, i risultati clinici ottenuti utilizzando miele di manuka su pazienti con diabete indicano che si ottiene una rapida guarigione-ulcere diabetiche delle gambe che erano state nonhealing per lunghi periodi guariti per lo più entro 3 mesi quando vestito con miele di manuka.22

La componente antibatterica del miele di manuka è una piccola molecola idrosolubile che si diffonde facilmente, il che spiega perché il miele di manuka ha anche mostrato efficacia contro i batteri contenuti nei biofilm., La cronicità prolungata delle ferite può essere attribuita alla colonizzazione della ferita che si sviluppa in un biofilm in cui i batteri rimangono protetti dalla matrice del biofilm. Questi batteri non possono essere eliminati dal sistema immunitario ospite e mostrano resistenza agli agenti antimicrobici sia sistemici che topici.23 Questo può spiegare perché gli antibiotici sono di uso limitato nel trattamento delle ferite croniche.23 Miele di Manuka ad una concentrazione del 40% è stato trovato per dare biomassa biofilm significativamente ridotta con test in vitro di isolati clinici di P. aeruginosa che si erano sviluppati in un biofilm.,24 Un risultato simile è stato fatto in uno studio comparabile condotto con Streptococcus pyogenes.25 In un altro studio condotto con biofilm sviluppato da 11 isolati ciascuno di S. aureus sensibile alla meticillina (MSSA), MRSA e P. aeruginosa, è stato riscontrato che il 50% di miele di manuka ha ucciso 9 su 11, 7 su 11 e 10 su 11 degli isolati, rispettivamente.26 Maggiore sensibilità è stata trovata in un altro studio sui biofilm formati in vitro dove il MIC per il miele di manuka era del 6% di miele per MRSA e S. epidermidis resistente alla meticillina e del 12% di miele per P. aeruginosa e ESBL Klebsiella pneumoniae.,27

Clinicamente, ci sono stati molti rapporti28-31 pubblicato di miele di manuka essere efficace nel raggiungere la guarigione delle ferite croniche. Uno di questi è stato uno studio osservazionale in cui 20 pazienti con lesioni del midollo spinale che avevano ulcere da pressione croniche (5 avevano ulcere di grado IV e 15 avevano ulcere di grado III) sono stati trattati con miele di manuka.28 Dopo 1 settimana di trattamento con miele di manuka tutti i tamponi erano privi di crescita batterica e, dopo un periodo di 4 settimane, 18 pazienti hanno mostrato una completa guarigione della ferita., Un altro studio29 ha esaminato 40 pazienti con ulcere alle gambe che non avevano risposto a 12 settimane di terapia compressiva. Le medicazioni al miele di Manuka sono state applicate alle ulcere per un periodo di studio di 12 settimane. Nel complesso, il dolore e le dimensioni dell’ulcera diminuivano significativamente e le ferite odorose venivano deodorate prontamente. Il punteggio medio del dolore misurato sulla scala dell’indice del dolore McGill era diminuito da 1,6 ± 1,22 a 1,08 ± 1,54 dagli endpoint dei singoli pazienti. Il tasso medio di riduzione dell’area della ferita è stato del 5,46%. Alla prima valutazione (dopo 2 settimane) il punteggio medio per l’odore era diminuito da 1,58 ± 0,90 a 0,69 ± 0.,79 (su una scala in cui 3 indicava odore grave), con 11/26 (42%) senza odore.29 Un ulteriore studio30 ha mostrato un gruppo di 8 pazienti con ulcere venose non cicatrizzate o ricorrenti alle gambe trattate con miele di manuka guarite con chiusura accelerata della ferita, e uno studio31 di 11 casi riguardanti solo ulcere venose non cicatrizzate che non rispondevano a una varietà di opzioni di trattamento usuali ha mostrato che le ferite trattate con medicazioni al miele di manuka avevano una chiusura completa in 3-6 settimane. Ci sono state anche molte segnalazioni di singoli casi di studio in cui il miele di manuka ha portato alla guarigione di ferite precedentemente non cicatrizzate.,32-39

Azione immunostimolante. È possibile che la clearance dell’infezione da parte dell’attività antibatterica del miele possa essere ulteriormente aumentata dalla sua azione immunostimolante, anche se ci sarà sempre una certa attenuazione di ciò dall’attività antinfiammatoria del miele. Indipendentemente dal fatto che la stimolazione della risposta immunitaria contribuisca alla guarigione delle ferite aiutando a sopprimere l’infezione, contribuirà sicuramente alla guarigione attraverso la stimolazione e la crescita del tessuto riparatore., È un’osservazione clinica comunemente riportata che la guarigione rapida si ottiene quando le ferite sono vestite con miele, 3, 4 e osservazioni simili sono state fatte in numerosi esperimenti sugli animali.40 Questi risultati potrebbero essere considerati una conseguenza dell’infezione che sopprime il miele; tuttavia, negli esperimenti in cui le ferite da ustione dermica sono state inflitte su suini41,42 e rats43 in condizioni chirurgiche, le ferite create erano esenti da batteri e il tasso di guarigione era ancora aumentato dopo l’applicazione del miele.,

Il lavoro in vitro ha dimostrato che l’attività immunostimolante del miele sui leucociti provoca la produzione di citochine, che porta alla stimolazione e alla crescita delle cellule. Il miele ad una concentrazione dell ‘ 1% è stato trovato per stimolare il rilascio del fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α) da parte dei monociti.44 Sebbene la stimolazione dell’infiammazione sia generalmente considerata dannosa, vi è una modulazione di questa risposta infiammatoria da parte dell’attività antinfiammatoria del miele., Così, quando il miele 1% è stato aggiunto ai macrofagi infiammati formati dall’attivazione dei monociti da lipopolisaccaride e zymosan opsonizzato, non vi è stato alcun aumento del rilascio di TNF-α e il miele ha soppresso la produzione di intermedi reattivi di ossigeno formati nello scoppio respiratorio.44

In uno studio simile, il miele ad una concentrazione dell ‘ 1% è stato trovato per stimolare il rilascio di TNF-α, interleuchina-1 beta (IL-1β) e IL-6 dai monociti, citochine note in vivo per svolgere un ruolo nella riparazione dei tessuti.,45 Cheratinociti sono stati trovati per avere trascrizione dei geni per le citochine TNF-α, IL-1β e TGF-α upregulated dal miele ad una concentrazione di 1%.46 Inoltre, il miele ha sovraregolato il gene per la metallopeptidasi 9 della matrice (MMP-9), che è una proteasi che stacca i cheratinociti dalla membrana basale per consentire la loro migrazione nella reepitelizzazione.46 La reepitelializzazione sarebbe anche promossa da un aumento dei livelli di TNF-α e IL-1β, che inducono la produzione del fattore di crescita dei cheratinociti fattore di crescita dei fibroblasti 7.,46 Miele è stato anche dimostrato di stimolare l’angiogenesi in vitro47 in un saggio di anello aortico ratto, al massimo a circa una concentrazione di miele dello 0,2%.

Questa attività immunostimolante del miele è stata attribuita a vari componenti da diversi autori: major royal jelly protein-1 (MRJP-1), arabinogalactan, contaminante dell’endotossina nel miele e una sostanza di peso molecolare 5.8 kDa.48 Major royal jelly protein-1 è stato trovato per dare solo un contributo minore alla stimolazione dei cheratinociti, quindi si è concluso che un altro componente deve essere responsabile.,46 In uno studio di stimolazione del rilascio di TNF-α dai monociti, è stato trovato che l’arabinogalattano-complesso di proteine isolate dal miele deve essere una concentrazione di più di 25 µg/ml per dare la quantità di stimolazione data di 0,5% di miele, ma, al momento di calcolo, il dichiarato concentrazione di arabinogalattano-complesso di proteine nel miele (10 µg/g) ha fatto sì che lo 0,5% di miele conteneva solo 0,05 µg/ml di arabinogalattano.49 È stata esclusa la possibilità che la stimolazione fosse dovuta all’endotossina, e quindi il principale fattore immunostimolante è stato concluso per essere un componente non identificato del peso molecolare 5.,8 kDa che non è una proteina.50 Questo componente non identificato è stato trovato per funzionare attraverso la stimolazione del recettore toll-like 4 sui leucociti.50

Azione antinfiammatoria. Il miele ha una lunga storia di utilizzo come sostanza antinfiammatoria. L’antico medico e farmacologo greco Pedanius Dioscorides usava il miele per trattare scottature e macchie sul viso, nonché per curare l’infiammazione della gola e delle tonsille.,51 In epoca moderna, ci sono state numerose osservazioni di miele applicato a ferite infiammate e ustioni con conseguente edema ridotto e essudato, fornendo un effetto calmante, e riducendo al minimo cicatrici.52 Negli studi clinici sulle ustioni che hanno confrontato il miele con la sulfadiazina d’argento, il miele ha mostrato una diminuzione dei livelli del marker per l’infiammazione, una diminuzione dei livelli di malondialdeide,53 e un numero ridotto di cellule infiammatorie presenti nei campioni bioptici.,54 Le numerose segnalazioni di attività antinfiammatoria in ferite sperimentali e ustioni di modelli animali, dove erano presenti pochi o nessun batterio (a causa di ferite prodotte asetticamente), 52 indicano che il miele ha un’attività antinfiammatoria diretta, la diminuzione dell’infiammazione non è semplicemente un effetto secondario dell’attività antibatterica del miele che rimuove i batteri che causano l’infiammazione.

L’attività antinfiammatoria del miele è stata dimostrata anche in studi clinici per ridurre la gravità della mucosite nella radioterapia della regione della testa e del collo,55-58 e per trattare la gengivite.,L’attività antinfiammatoria 59 inoltre è stata osservata negli studi clinici per trattare la dispepsia60 ed è risultata efficace nel sollievo di varie condizioni infiammatorie oftalmologiche.61 Il miele è stato trovato per diminuire il dolore dopo la rimozione chirurgica delle tonsille dei bambini, 62 e anche per diminuire il dolore nelle ulcere delle gambe non cicatrizzate.29 In esperimenti con ratti, il miele ha dimostrato una riduzione altamente significativa delle aderenze peritoneali dopo l’intervento chirurgico sul cieco, 63 efficacia come trattamento per la colite indotta chimicamente, 64-67 e prevenzione della gastrite causata dal dosaggio somministrato di etanolo.,68-70 Iniezione di 50% di miele in zampe di ratto prima di iniettare lipopolisaccaride per causare infiammazione provocato meno gonfiore, ridotta sensibilità al dolore, e un livello inferiore di marcatori infiammatori.71 In uno studio sull’edema indotto da carragenina nelle zampe di ratto, il pretrattamento con dosi orali di miele ha dato una riduzione dose-dipendente dell’edema e una soppressione nell’espressione dei geni per l’ossido nitrico sintasi inducibile, COX-2, TNF-α e IL-6.,72

Questa attività antinfiammatoria ben documentata nel miele è stata attribuita agli attuali composti fenolici della pianta73; tuttavia, non è stata trovata alcuna correlazione tra il livello di attività antinfiammatoria osservato in vari mieli e i composti fenolici noti presenti.74 Una vasta gamma di varietà di mieli è stata testata per l’attività antinfiammatoria: miele di pascolo, miele di trifoglio, miele di ranuncolo di kanuka e miele di melata di faggio.,75 Componenti fenolici potrebbero essere coinvolti, in quanto sono come una classe di composti noti per inibire la produzione della citochina infiammatoria TNF-α,76 ma più recentemente, è stato identificato un altro importante componente antinfiammatorio del miele che non è un composto fenolico ma piuttosto una proteina che funziona in modo diverso.77 Questa proteina derivata dalle api, l’apalbumina-1, è stata identificata come il componente del miele che inibisce la fagocitosi da parte dei macrofagi, il primo passo nella sequenza di una risposta infiammatoria al tessuto necrotico e/o alle cellule microbiche., Si è constatato che il miele di manuka è un inibitore molto più forte della fagocitosi rispetto ad altri tipi di miele. È stato determinato che il metilgliossale, una sostanza trovata in quantità significative solo nel miele di manuka, reagisce con l’apalbumina-1 per glicarlo, e questa apalbumina-1 glicata è un inibitore molto più forte della fagocitosi rispetto all’apalbumina-1 non modificata generalmente presente in altri tipi di miele. Una soluzione allo 0,5% di miele di manuka ha dato il 67% di inibizione della fagocitosi., Il meccanismo di azione di apalbumina-1, sia le forme glicate che non modificate, è bloccando il recettore del mannosio sui fagociti che è l’innesco della fagocitosi.77

Debriding azione. Lo sbrigliamento delle ferite con medicazioni al miele è stato osservato in studi clinici sulle ustioni.54,78,79 In una di queste prove,54 miele è stato trovato per prevenire la formazione di escar, mentre escar formata nei casi trattati con sulfadiazina argento., Sette serie di casi e dieci singoli casi di studio in cui il miele è stato segnalato per essere efficace nel debriding ferite sono stati delineati in una revisione delle prove cliniche per l’efficacia del miele come agente debriding.80

Studi clinici hanno anche dimostrato che il miele è una buona alternativa allo sbrigliamento chirurgico per il trattamento della fascite necrotizzante nella regione genitale.81-83 In uno studio clinico che ha confrontato il miele con l’idrogel per il debridement delle ferite, è stato riscontrato che il debridement migliore è stato ottenuto con il miele, sebbene non vi fosse una differenza statisticamente significativa.,84 I risultati sono stati confrontati con quelli pubblicati da altri studi e si è concluso che nella desloughing delle ulcere venose delle gambe, il miele di manuka è più lento della terapia larvale o del curettage ma superiore ad alcuni idrogel, agenti enzimatici, idrocolloidi, garza di paraffina o iodio cadexomero. In uno studio su ferite di coniglio sperimentali adiacenti, le ferite trattate con garza imbevuta di miele sono state mantenute pulite mentre le ferite trattate con garza imbevuta di soluzione salina formavano spesse croste dense.,85

Recentemente è stata scoperta una possibile spiegazione del meccanismo con cui il miele provoca lo sbrigliamento delle ferite.86 È stato ipotizzato che il miele aumenti l’attività della plasmina, un enzima che digerisce specificamente la fibrina (la fibrina si attacca alla superficie della ferita) ma non digerisce la matrice di collagene necessaria per la riparazione dei tessuti., Nel lavoro con colture di macrofagi infiammati è stato dimostrato che il miele aumentava l’attività della plasmina nel mezzo di coltura e che l’attività della plasmina aumentava perché il miele inibiva la produzione di inibitore dell’attivatore del plasminogeno (PAI) dai macrofagi. L’inibitore dell’attivatore del plasminogeno normalmente blocca la conversione del plasminogeno (il precursore enzimicamente inattivo della plasmina) in plasmina attiva., L’infiammazione aumenta la produzione di PAI,87 quindi c’è da aspettarsi che il miele porterebbe ad una diminuzione della produzione di PAI a causa della ben consolidata attività antinfiammatoria del miele.