8-22. Citotóxicas efetoras proteínas que desencadeiam a apoptose estão contidos no thegranules de células T citotóxicas CD8
O principal mecanismo através do qual células T citotóxicas ato é por thecalcium dependentes do lançamento do especializadas líticas grânulos após o reconhecimento do antígeno na superfície da atarget célula. Estes grânulos são lisossomas modificados que contêm, pelo menos, duas classes distintas de proteína efectora citotóxica que são expressas selectivamente células T incitotóxicas (Fig. 8.36)., As suchproteinas são conservadas nos grânulos líticos numa forma activa, mas as condições nos grânulos impedem o seu funcionamento até à sua libertação. Uma destas proteínas citotóxicas, conhecidas como perforina, polimeriza-se para formar poros transmembranares em células-alvo. A outra classe de proteínas citotóxicas compreende pelo menos três eproteases denominadas granzimas, que pertencem à mesma família de enzimas—as proteases serinas—que as digestivas benzinas tripsina e quimotripsina. Os grânulos que armazenam perforina e granzimas podem ser observados em células efectoras citotóxicas CD8 armadas em lesões tecidulares.,
figura 8.36
proteínas efectoras citotóxicas libertadas por células T citotóxicas. quando se adicionam grânulos purificados de células T citotóxicas às células-alvo in vitro, lêem as células criando poros na camada intermédia citotóxica. Os poros consistem em polímeros de perforina, que é uma majorconstituente destes grânulos. Após a libertação do grânulo, a perforina forma uma estrutura acilíndrica que é lipofílica no exterior e hidrofílica abaixo do centro aollow com um diâmetro interno de 16 nm (Fig. 8.37)., Não se sabe se esta estrutura é formada pela primeira vez e então inserida na camada lipídica da membrana celular alvo, ou se é formada na própria camada intermédia. O poro que é formado permite que a água e o sal passem rapidamente para a célula. Com a integridade da célula tingida, as células morrem rapidamente. Um grande número de grânulos purificados pode matar as células in vitro sem induzir a fragmentação do ADN celular, mas este mecanismo lítico de occisão celular provavelmente ocorre apenas em níveis elevados de perforina que não reflectem a fisiologicalactividade das células T citotóxicas.,
figura 8.37
perforina libertada dos grânulos líticos da célula T citotóxica insere-se na membrana da célula alvo para formar poros. As moléculas de perforina, bem como várias outras moléculas efectoras, mantêm-se nos grânulos de células T citotóxicas (painel a). Quando (mais…)
tanto a perforina como as granzimas são necessárias para o abate efectivo das células. Os separateróis de perforina e granzimas foram investigados num sistema celular que se baseia em semelhanças entre os grânulos líticos das células T e os granulados de mastócitos., A libertação de mastócitos ocorre na ligação cruzada do receptor Fce (ver Capítulo 9), assim como a libertação de grânulos líticos a partir de células CD8 T ocorre na ligação cruzada do receptor da célula T. Pensa-se que o mecanismo de sinalização para a libertação de grânulos seja o mesmo ou semelhante em ambos os casos, uma vez que tanto o receptor da Fce como o receptor da Célula T têm motivos ITAM nos seus domínios citoplásmicos, e ligações cruzadas levam à fosforilação da totirosina das ITAMs (ver Capítulo 6).,quando uma linha mastocelular é transfectada com o gene para a perforina ou para a granzima,os produtos genéticos são armazenados em granulado mastocelular, e quando a célula é inactivada através do seu receptor de ECF, estes grânulos são libertados. Quando sentenciadas apenas com o gene para a perforina, mastócitos podem matar outras células,mas um grande número de células transfectadas são necessárias, uma vez que a matança não é muito eficiente. Em contrapartida, as células mastigadas com o gene da granzyme Balone não conseguem matar outras células., No entanto, quando mastocélulas transfiguradas por perforina são também transfectadas com o gene que codifica a granzima B, as células ou os seus grânulos enriquecidos tornam-se tão eficazes para matar alvos como grânulos a partir de células citotóxicas, e os grânulos de ambos os tipos de células induzem fragmentação do ADN.Isto sugere que o perforin produz poros através dos quais as granzimas podem mover-se para a célula alvo.
As granzimas são proteases, por isso, embora tenham um papel na activação da apoptosisina na célula alvo, não podem actuar directamente para fragmentar o ADN., Em vez disso, a theymust activa uma enzima, ou mais provavelmente uma cascata enzimática, na célula alvo.A granzima B pode clivar a omnipresente enzima celular CPP-32, que acredita ter um papel fundamental na morte celular programada em todas as células. A CPP-32 é uma caspase e activa uma nuclease, chamada desoxirribonuclease activada pela caspase ou CAD, originando uma proteína inibitória (ICAD) que se liga e inactiva a CAD. Pensa-se que esta enzima seja o efeito final da degradação do ADN na apoptose.as células sujeitas a morte celular programada são rapidamente ingeridas por células fagocíticas próximas., Os fagócitos reconhecem alguma mudança na membrana celular, provavelmente a exposição da fosfatidilserina, que é normalmente encontrada apenas na parte interna da membrana. A célula ingerida é então completamente decomposta e digerida pelo fagócito sem a indução de proteínas Co-estimuladoras.Assim, a apoptose é normalmente um processo imunologicamente “silencioso”, ou seja, as células apoptóticas não contribuem normalmente para ou estimulam as respostas imunitárias.
a importância da perforina neste processo está bem ilustrada em ratinhos que tiveram o seu gene da perforina eliminado., Tais ratos são severamente danificado em theirability para montar um citotóxica de células T de resposta para muitos, mas não todos os vírus,enquanto que os ratos que são defeituosos no granzyme B gene têm uma menor profounddefect, provavelmente porque existem vários genes que codificam para granzymes.
Deixe uma resposta