Introdução

Pseudomonas aeruginosa é um membro do gênero Pseudomonas. São bactérias Gram-negativas comumente encontradas em vários ambientes úmidos.

embora a bactéria seja um agente patogénico responsável por várias infecções hospitalares, estas infecções são particularmente graves entre indivíduos com um sistema imunitário comprometido.,

Características

Como mencionado, a Pseudomonas aeruginosa é onipresente na natureza e pode ser encontrado em vários ambientes húmidos. Isso tem sido atribuído ao fato de que a bactéria é caracterizada por uma extensa diversidade metabólica que lhe permite viver e prosperar em vários nichos ecológicos.,

no que diz respeito à cultura microbiana, isto é particularmente importante dado que uma variedade de meios de crescimento pode ser usado. Enquanto a bactéria cresce bem a 37 graus C, Ela também pode sobreviver na faixa de temperatura entre 4 e 42 graus C.

para estudar várias características da Pseudomonas aeruginosa, alguns dos meios utilizados incluem o ágar de isolamento Pseudomonas, caldo de LB, rei A e MOPS ().,

para cultivar as bactérias em ágar de isolamento de Pseudomonas, as placas (placas limpas e estéreis) são primeiramente permitidas para aquecer à temperatura ambiente. Verte-se então o ágar nas placas e deixa-se secar antes da inoculação. Uma vez seco o ágar, o espécime deve ser inoculado o mais rapidamente possível após a sua colheita.

geralmente, a inoculação envolve listar a amostra sobre a superfície do ágar (cobrindo cerca de um terço da superfície)., Aqui, a estria deve ser feita usando um laço estéril, a fim de evitar contaminar o meio com outros microrganismos.

Após a inoculação, a placa ou placas são incubadas por 1 (um) dia a 37 graus C em condições aeróbias. Após 24 anos, Pseudomonas aeruginosa aparece como colónias verdes-azuis. Se Outras Pseudomonas ou bactérias não fermentantes estão presentes, eles não são azul-verde em cor.,

vale a pena notar que os pigmentos (pigmentos solúveis em água) produzidos por Pseudomonas aeruginosa podem variar dependendo do meio ou estirpe de bactérias.

alguns dos pigmentos mais comuns incluem; piocianina que é azul-verde na cor, pioverdina que é amarelo-verde na cor, e piorubina que é vermelho-marrom na cor.

além das Colónias pigmentadas, Pseudomonas aeruginosa cultivada em meios também é caracterizada pelo cheiro de uva., Sendo um não-fermentador, a bactéria também está associada com a produção de ácido na cultura ao invés de gases que são comumente associados com bactérias fermentantes.

Estudos têm mostrado que, na presença de nitrato, Pseudomonas aeruginosa pode crescer lentamente em um ambiente anaeróbio em cerca de 42 graus C.

Além dos meios acima mencionados, Pseudomonas aeruginosa também pode ser cultivado em MacConkey agar (uma cultura bacteriana médio comumente usados para o cultivo de lactose da fermentação de bactérias)., Embora a bactéria não possa utilizar a lactose presente neste meio, sobrevive em peptona.

In MacConkey agar, Pseudomonas aeruginosa forms flat and smooth colonies that are between 2 and 3mm in diameter. Geralmente, essas colônias têm margens regulares e têm uma aparência de pele de jacaré quando visto de cima.

See more on Cell Culture.,osa colônias (verde-azul na cor) são de tamanho médio e caracterizada por um crescimento irregular

· Em agar Nutriente – Pseudomonas aeruginosa estão associados a vários odores que vão desde um doce cheiro de terra

Gram

Crescimento de bactérias na cultura é importante na medida em que permite que os pesquisadores para analisar e estudar as várias características (cheiro, a textura e a forma de colônias, a cor da colônia, etc) do organismo.,

usando a técnica de coloração de Gram torna possível aos investigadores não só identificar características morfológicas das células bacterianas, mas também diferenciá-las com base nos seus componentes da parede celular.

Requisitos para a coloração de Gram incluem:

Exemplo – Pseudomonas aeruginosa cultivadas em cultura pode ser utilizado.,

  • lâminas de Vidro
  • Gram reagentes
  • laço de Fio
  • Água
  • Gravador

Procedimento

· Se a amostra for obtida a partir de uma placa de cultura, em seguida, é necessário adicionar uma gota de água sobre a lâmina de vidro antes de assepticamente a adição de uma pequena quantidade de bactérias.,rcent álcool) no diapositivo e, em seguida, enxágüe com água

· Inundação slide com Safranin (counterstain) e, em seguida, enxágüe com água

· Adicione uma gota de óleo de imersão sobre o slide e observar ao microscópio

* a Preparação de vários slides (cerca de 3 slides) é sempre recomendado

Veja mais na Célula de coloração.,

Observação

Quando visto sob o microscópio, Pseudomonas aeruginosa, aparece como avermelhado/cor-de-rosa hastes. Isto indica que eles são bactérias Gram-negativo dado que eles são incapazes de reter a mancha primária (violeta de cristal).

Under high magnification, studies have shown as Pseudomonas aeruginosa to range from 0.5 to 0.8 um in diameter and 1.5 to 3.0 um in length (rod-like bacteria)., Eles também são caracterizados por um único flagelo polar usado para a motilidade.

para algumas estirpes, estudos revelaram a presença de duas a três flagelas polares utilizadas para o movimento. Além da flagela, Pseudomonas aeruginosa também possuem pili em sua superfície que são usados para a aderência e uma forma de motilidade conhecida como motilidade twitching.

Leia mais sobre Gram-positivas e bactérias Gram-negativas.,

a Infecção

Como mencionado, a Pseudomonas aeruginosa é responsável por diversas infecções hospitalares.

de Acordo com um relatório publicado pelo Centro Europeu para Prevenção e Controle da Doença em 2012, cerca de 9% de todas as infecções associadas a cuidados são causadas por Pseudomonas aeruginosa, sendo a quarta mais comum patógeno responsável por infecções em hospitais Europeus.,

na maior parte, a bactéria é um agente patogénico oportunista dos tecidos das mucosas. No entanto, foram notificadas infecções da córnea (o olho) e do tracto urinário.

dependendo do doente, as infecções do tracto respiratório vão desde pneumonia nosocomial a infecções pulmonares entre doentes com fibrose quística.,

Nosocomial Infections

Essentially, nosocomial infections are hospital-acquired infections and thus occur post-admission.,

Algumas dessas infecções incluem:

Gravar infecções de feridas – além de Staphylococcus aureus e o Streptococcus pirógenos, Pseudomonas aeruginosa é uma das principais causas de técnicas invasivas de infecções entre os pacientes da queimadura. Aqui, o local da lesão (a partir da queimadura) permite a invasão sucessiva da bactéria.,

para além de entrar no corpo através da pele ferida, a bactéria tem demonstrado ganhar entrada como resultado de lesões por inalação, aumentando assim o risco de infecções respiratórias.

Bacteremia – Pseudomonas aeruginosa também é uma das principais causas de bacteremia nosocomial. Dado que este organismo específico demonstrou ser resistente a vários antimicrobianos, estas infecções têm demonstrado resultar em maior mortalidade em comparação com alguns dos outros agentes patogénicos responsáveis pela bacteremia.,

Hospital e pneumonia associada à ventilação mecânica – Dado que o trato respiratório fornece condições favoráveis para a vida, a bactéria é facilmente capaz de causar crônica e aguda infecções entre os pacientes com fibrose cística.

in addition, the pathogen has also been shown to be one of the main causes of ventilator-associated pneumonia (VAP) particularly in the case of increased duration of mechanical ventilation.,

Infecção do Trato Urinário

Pseudomonas aeruginosa tem sido mostrado para ser particularmente eficaz na formação de superfície associadas a biofilmes. Para pacientes que usam cateteres, a bactéria tem sido mostrado para formar biofilme na superfície desses cateteres (cateteres internos) e, em última análise, causar uma infecção à medida que proliferam.,

Pathogenesis and Virulence Factors of Pseudomonas aeruginosa

Pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa is made possible by several virulence factors that include:

Lipopolysaccharide – Lipopolysaccharide is one of the main components of the outer membrane of Pseudomonas aeruginosa., Além do lípido a, um domínio hidrofóbico, este componente da membrana externa também consiste em o-antigénio (polissacárido distal) que não só determina o serótipo do organismo, mas também activa o sistema imunitário do hospedeiro.

eventualmente, o polissacárido resulta em inflamação disregulada que tem sido associada a morbilidade e mortalidade.

Flagelo, Como mencionado, Pseudomonas aeruginosa contém um único flagelo polar usado para a natação em ambientes húmidos., Além da motilidade, esta estrutura também tem sido mostrado para desempenhar um papel importante no apego ao epitélio, invasão, bem como a formação de biofilmes.

Pili Tipo IV localizado na superfície de Pseudomonas aeruginosa desempenham um papel importante na adesão a várias células, promovendo assim infecções. Além da adesão, o pili também tem sido mostrado estar envolvido na motilidade twitching que, por sua vez, promove a formação de biofilmes.,div>· Proteases – Pseudomonas aeruginosa produces a number of proteases including LasB and alkaline protease that destroy tissue

· Alginate – is one of the main components of mucoid exopolysaccharide capsule and plays an important role in cell adherence

Antibiotic Resistance

Following an infection, Pseudomonas aeruginosa has been shown to be resistant to a variety of antimicrobials.,

Há vários modos de resistência incluem:

Intrínseco de resistência a antibióticos – se, Essencialmente, intrínseco de resistência a antibióticos refere-se à capacidade inata de bactérias para evitar os impactos de antibióticos. Isto pode ser conseguido através de várias características estruturais e funcionais.,

Alguns dos mecanismos através dos quais a Pseudomonas aeruginosa é capaz de reduzir a eficácia de vários antibióticos (intrinsecamente) incluem:

Permeabilidade da membrana externa – Em Pseudomonas aeruginosa, a membrana externa é assimétrico bicamada que consiste de fosfolipídios e LPS (Lipopolysaccharides). Também consiste em porinas que são responsáveis pelos canais de proteína beta-barril.,

a composição desta membrana torna-a muito restritiva e é responsável por limitar a penetração de antibióticos. No entanto, a membrana não impede completamente esta Penetração. Em vez disso, a lenta absorção destas moléculas contribui para a resistência intrínseca.

Sistemas de efluxo – para além da membrana externa limitante, Pseudomonas aeruginosa também é capaz de bombear compostos tóxicos., Em particular, estudos demonstraram que as proteínas associadas à família resistência-nodulação-divisão (RND) estão largamente envolvidas nesta actividade nesta bactéria.

aqui, as proteínas constituem transportadores de membrana citoplásmica e proteínas do canal de porina de membrana exterior envolvidas na expulsão de compostos tóxicos para fora da célula. Nos casos em que estas bombas são sobreexpressas, a bactéria gradualmente desenvolve resistência a uma variedade de medicamentos.,

Antibiótico-inactivação de enzimas – Um dos outros fatores que contribuem para a resistência a antibióticos é a capacidade da bactéria de produzir enzimas capazes de quebrar e modificação de antibióticos.

em particular, Pseudomonas aeruginosa demonstrou produzir enzimas como a enzima hidrolítica β-lactamase que quebra a ligação amida de certos antibióticos. Ao fazê-lo, a droga se torna ineficaz contra o patógeno.

também: como os antibióticos matam bactérias?,

Adquirido Resistência a Antibióticos

Adquiriram resistência aos antibióticos é o segundo mecanismo através do qual a Pseudomonas aeruginosa têm desenvolvido resistência a antibióticos.

Este é alcançado através de:

Mutacional de alteração Mutacional alteração é particularmente benéfica para o patógeno, como a modificação de antibiótico metas lhes permite fugir das ações pretendidas da droga., Isto pode envolver a sobreexpressão das bombas de efluxo e, portanto, a capacidade da bactéria para remover substâncias tóxicas da célula.

genes de resistência adquirida – As bactérias demonstraram ser capazes de adquirir genes através de transferência horizontal. No caso de várias estirpes de P. aeruginosa, a aquisição de genes de resistência permite à bactéria desenvolver resistência a vários antibióticos. Esta transferência pode ocorrer por conjugação, transdução ou transformação.,

Adaptável a Resistência a Antibióticos

O último mecanismo de resistência aos antibióticos é através adaptável a resistência a antibióticos. Geralmente, isso é conseguido através da formação de um biofilme. Um biofilme refere-se à aderência ou agrupamento de microrganismos numa determinada superfície.

no hospedeiro, o biofilme formado por Pseudomonas aeruginosa é então coberto por uma matriz., Em comparação com outras células patogénicas, estas células tendem a ser menos sensíveis aos agentes antimicrobianos.

Teste de Susceptibilidade Antimicrobiana

Como mencionado, Pseudomonas aeruginosa tem sido mostrado para ser resistente a uma série de antibióticos. Isto é devido a uma série de fatores de virulência associados com o organismo. Por esta razão, o teste de susceptibilidade antimicrobiana é um teste importante para determinar o tratamento mais eficaz para tratar infecções causadas pela bactéria.,

essencialmente, o teste de susceptibilidade antimicrobiana envolve a colocação de um microrganismo em contacto com antibióticos, a fim de estudar se o organismo irá ou não crescer na presença dos antibióticos utilizados.

Aqui, Mueller-Hinton agar usando difusão de disco pode ser usado para o teste, dado que a técnica é aplicável para uma ampla gama de bactérias exigentes, com pouca mudança de erro.,/div>· A mistura é então aquecida por cerca de 1 minuto, com frequente agitação, a fim de garantir que o conteúdo misture bem

· O agar-agar é autoclavados por 15 minutos, a 121 ° C e, em seguida, deixar esfriar a 45 graus C

· O agar-agar é então colocada em placas de Petri, a uma profundidade de cerca de 4mm

· As placas são permitidos para solidificar em temperatura ambiente e investigados para garantir que o pH permanece 7.,3 +11 a 25 graus C

* uma Vez que o pesquisador está pronto para testar a sensibilidade/susceptibilidade do patógeno a bactéria é inoculado e antimicrobiana dos discos colocados sobre a cultura (utilizando uma pinça esterilizada). As placas são então invertidas e incubadas a 37 graus C durante entre 16 e 18 horas.

* os discos antibióticos contêm o medicamento a ser testado.,me of the antibiotics used to test sensitivity/susceptibility of Pseudomonas aeruginosa include:

  • Ticarcillin
  • Aztreonam
  • Ciprofloxacin
  • Kanamycin
  • Cefepime

Water Treatment

While Pseudomonas aeruginosa is ubiquitous in nature, it’s commonly found in moist environments., Por esta razão, também é encontrado em várias massas de água, incluindo lagos e rios, etc. Para prevenir possíveis infecções, é necessário tratamento de água.

teste de susceptibilidade antimicrobiana é usado para determinar o desinfectante de água mais eficaz. Aqui, este teste também considera o impacto que os desinfectantes que estão sendo testados podem ter na saúde daqueles que usam a água.,

com base em estudos anteriores, a Pseudomonas aeruginosa demonstrou ser susceptível a vários desinfectantes, incluindo ozono, iodo, cloraminas e cloro. Por esta razão, eles são comumente usados para tratar a água em muitas nações desenvolvidas e em desenvolvimento.

Enquanto UV (ultravioleta) desinfecção provou ser eficaz para uma série de outros micro-organismos na água, esta forma de tratamento tem sido mostrado para ser menos eficazes quando se trata de Pseudomonas aeruginosa., Como resultado, as opções de tratamento de água acima mencionadas são frequentemente recomendadas.,s syringae

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Barbara H., Iglewski. (1996). Pseudomonas. Microbiologia Médica. 4th edition.

Benie CKD et al. (2017). Prevalence and Antibiotic Resistance of

Pseudomonas aeruginosa Isolated from Bovine Meat, Fresh Fish and Smoked Fish.

Kristina D Mena and Charles P Gerba. (2009). Risk assessment of Pseudomonas aeruginosa in water.

Patricia Ruiz-Garbajosa and Rafael Cantão. (2017). Epidemiology of antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa. Implications for empiric and definitive therapy.,

Robert B. Fick, Jr. (1993). Pseudomonas Aeruginosa, o oportunista.