8-22. Citotoxice efectoare proteine care declanseaza apoptoza sunt cuprinse în thegranules de CD8 citotoxice limfocitele T
principalul mecanism prin care celulele T citotoxice act este de thecalcium dependente de eliberarea de specialitate litice granule la recunoașterea de antigen de pe suprafața atarget mobil. Aceste granule sunt lizozomi modificați care conțin cel puțin douăclasele distincte de proteine efectoare citotoxice care sunt exprimate selectiv celule T incitotoxice (Fig. 8.36)., Astfelproteinele sunt depozitate în granule litice într-o formă activă, dar condițiileîn granule le împiedică să funcționeze până după eliberarea lor. Una dintre aceste proteine citotoxice, cunoscute sub numele de perforină, polimerizează pentru a forma pori transmembranari în celulele țintă. Cealaltă clasă de proteine citotoxice cuprinde cel puțin threeproteases numit granzymes, whichbelong din aceeași familie de enzime—serin-proteaze—ca digestiveenzymes tripsina și chimotripsina. Granulele care stochează perforina și granzimele potsă fie observate în celulele efectoare citotoxice CD8 armate în leziunile tisulare.,
figura 8.36
proteine efectoare citotoxice eliberate de celulele T citotoxice. când granulele purificate din celulele T citotoxice sunt adăugate la celulele țintă în vitro, acestea lizează celulele prin crearea porilor în stratul biliar lipidic. Porii constau din polimeri de perforină, care este majorăconstituent al acestor granule. La eliberarea din granule, perforin forme acylindrical structură care este lipofil la exterior și hidrofile jos ahollow centru cu un diametru interior de 16 nm (Fig. 8.37)., Nu se știe dacă această structură este formată mai întâiși apoi introdus în bistratul lipidic al membranei celulare țintă sau dacăse formează în bistratul însuși. Porul care se formează permite apei șisărurile să treacă rapid în celulă. Cu integritatea membranei celularedistruse, celulele mor rapid. Un număr mare de purificat granule poate killtarget celule in vitro fără a induce fragmentarea ofcellular ADN-ul, dar asta litice mecanism de uciderea celulelor probabil apare numai atartificially niveluri ridicate de perforin care nu reflectă physiologicalactivity de celulele T citotoxice.,
Figura 8.37
Perforin eliberat din granulele litice de T citotoxice cellscan inserează în membrana celulei țintă, pentru a forma pori. Moleculele de perforină, precum și alte câteva molecule efectoare, suntconținute în granulele celulelor T citotoxice (Panoul a). Când (mai mult…atât perforina cât și granzimele sunt necesare pentru uciderea eficientă a celulelor. La separateroles de perforin și granzymes au fost investigate într-un sistem de celule de thatrelies pe similarități între litice granule de celule T și granulesof mastocite., Eliberarea granulelor celulelor mastocite are loc la reticularea receptorului Fce (vezi capitolul 9), la fel cum eliberarea granulelor litice din celulele T CD8 are loc la reticularea receptorului celulelor T. Mecanismul de semnalizare pentru granule cu eliberare este considerat a fi identic sau similar în ambele cazuri, atât Fce receptori și celule T receptorhave ITAM motive în citoplasmatice domenii, și cross-linking duce totyrosine fosforilării ITAMs (a se vedea Capitolul 6).,
atunci Când un catarg-linie celulară este transfectate cu gena pentru perforin sau pentru granzyme,gena produsele sunt stocate în granulele mastocitare, și când celula isactivated prin Fce receptorilor, aceste granule sunt eliberate. Whentransfected cu gena pentru perforin singur, mastocite poate ucide alte celule,dar un număr mare de celule transfectate sunt necesare ca uciderea nu este veryefficient. În schimb, mastocitele transfectate cu gena pentru granzyme Balone nu pot ucide alte celule., Cu toate acestea, atunci când perforin-transfectate mastcells sunt, de asemenea, transfectate cu gena care codifică granzyme B, celulele sau theirpurified granule deveni la fel de eficiente la uciderea obiective sub formă de granule fromcytotoxic celule, și granule din ambele tipuri de celule induce fragmentare a ADN-ului.Acest lucru sugerează că perforin face pori prin care granzimele se pot deplasa în celula țintă.granzimele sunt proteaze, deci, deși au un rol în declanșarea apoptozeiîn celula țintă, ele nu pot acționa direct pentru a fragmenta ADN-ul., Mai degrabă, ei trebuie să activeze o enzimă, sau mai probabil o cascadă enzimatică, în celula țintă.Granzyme B poate despica omniprezente enzimă celulară CPP-32, care este believedto au un rol-cheie în moarte celulară programată în toate celulele. CPP – 32 este o caspazăși activează o nuclează, numită deoxiribonuclează activată de caspază sau CAD, prinlăsând o proteină inhibitoare (ICAD) care se leagă și inactivează CAD. Thisenzyme este considerat a fi efectorul final al degradării ADN-ului în apoptoză.
celulele supuse morții celulare programate sunt ingerate rapid de fagociticele din apropiere., Fagocitele recunosc unele modificări ale membranei celulare, cel mai probabilexpunerea fosfatidilserinei, care se găsește în mod normal numai în interiorul membranei. Celula ingerată este apoi complet descompusă șidigerate de fagocit fără inducerea proteinelor co-stimulatoare.Astfel, apoptoza este în mod normal un proces imunologic „liniștit”; adică celulele apoptotice nu contribuie în mod normal sau nu stimulează răspunsurile imune.importanța perforinei în acest proces este bine ilustrată la șoarecii care și-au scos gena perforinei., Astfel, șoarecii sunt grav defect în theirability pentru a monta un citotoxice T-celule, ca răspuns la multe, dar nu toate viruși,întrucât soareci care sunt defecte în granzyme B gene au o mai profounddefect, probabil pentru că există mai multe gene care codifică granzymes.
Lasă un răspuns