xmlns=”http://www.rsc.org/schema/rscart38″>membrana celulară este formată dintr-o rețea de glycoconjugates inclusiv glicoproteine și glicolipide care prezintă un dens matrice de carbohidrati joacă un rol important în multe procese biologice. Tehnologia pe bază de lectină a fost utilizată pe scară largă pentru a caracteriza glicoconjugatele în țesuturi și linii celulare., Cu toate acestea, specificitatea lor față de presupusul ligand glican și sensibilitatea in situ au fost dificil de studiat din punct de vedere tehnologic. În plus, deoarece recunosc în primul rând glicanii, obiectivele glicoproteinei subiacente nu sunt, în general, cunoscute. În acest studiu, am folosit etichetarea oxidativă a proximității lectinei (Lectin PROXL) pentru a identifica glicoproteinele de suprafață celulară care conțin glicani recunoscuți de lectine. Lectinele utilizate frecvent au fost modificate cu o sondă pentru a produce radicali de hidroxid în apropierea lectinelor etichetate., Polipeptidele subiacente ale glicoproteinelor recunoscute de lectine sunt oxidate și identificate prin fluxul de lucru proteomic standard. Ca rezultat, aproximativ 70% din glicoproteinele identificate au fost oxidate in situ de toate sondele lectin, în timp ce doar 5% din proteinele totale au fost oxidate. Corelația dintre glicoziți și locurile de oxidare a demonstrat eficacitatea sondelor lectin. Specificitatea și sensibilitatea fiecărui lectina au fost determinate cu ajutorul site-specific glycan informațiile obținute prin glycomic și glycoproteomic analize., În special, acid sialic-obligatoriu lectine și fucoza-obligatoriu lectine avut mai mare specificitate și sensibilitate în comparație cu alte lectine, în timp ce cei care au fost specifice înaltă manoză glicanii au o slabă specificitate și sensibilitate. Această metodă oferă o perspectivă unică asupra interacțiunilor de lectine cu glicoproteine specifice precum și proteine de rețele, care sunt mediate de anumite glycan tipuri pe membranele celulare.
Lasă un răspuns