Pseudomonas aeruginosa -Gram, Cultura, Caracteristicile, Infecție

Introducere

Cultura Caracteristicile

Așa cum am menționat, Pseudomonas aeruginosa este omniprezent în natură și pot fi găsite în diferite medii umede. Acest lucru a fost atribuit faptului că bacteria se caracterizează printr-o diversitate metabolică extinsă care îi permite să trăiască și să prospere în diferite nișe ecologice.,

în ceea ce privește cultura microbiană, acest lucru este deosebit de important, având în vedere că pot fi utilizate o varietate de medii de creștere. În timp ce bacteria se dezvoltă bine la 37 de grade C, se poate supraviețui, de asemenea, la interval de temperatură între 4 și 42 de grade C.

Pentru a studia diferite caracteristici de Pseudomonas aeruginosa, o parte din mass-media utilizate includ Pseudomonas agar de izolare, LB Bulion, Un Rege, și PERII ().,

pentru a crește bacteriile în Agar de izolare Pseudomonas, plăcile (plăci curate și sterile) sunt lăsate mai întâi să se încălzească la temperatura camerei. Agarul este apoi turnat în plăci și lăsat să se usuce înainte de inoculare. Odată ce agarul s-a uscat, specimenul trebuie inoculat în cel mai scurt timp posibil după ce a fost colectat.

în general, inocularea implică împrăștierea specimenului pe suprafața agarului (acoperind aproximativ o treime din suprafață)., Aici, dungarea trebuie făcută folosind o buclă sterilă pentru a evita contaminarea mediului cu alte microorganisme.

După inoculare, placa sau plăcile sunt incubate timp de 1 (una) zi de la 37 de grade C în condiții de aerobioză. După 24 de ani, Pseudomonas aeruginosa apare ca colonii albastru-verde. Dacă sunt prezente alte Pseudomonas sau bacterii care nu fermentează, acestea nu sunt de culoare Albastru-Verde.,

este de remarcat faptul că pigmenții (pigmenți solubili în apă) produși de Pseudomonas aeruginosa pot varia în funcție de mediul sau tulpina bacteriilor.

Unele dintre cele mai comune pigmenți includ; pyocyanin care este albastru-verde la culoare, pyoverdine care este galben-verde la culoare, și pyorubin care este roșu-maroniu.

în afară de coloniile pigmentate, Pseudomonas aeruginosa cultivată în medii este, de asemenea, caracterizată de miros asemănător strugurilor., Fiind un non-fermentor, bacteria este, de asemenea, asociată cu producția de acid în cultură, mai degrabă decât cu gazele care sunt frecvent asociate cu bacteriile de fermentare.

Studiile au arătat că în prezența nitraților, Pseudomonas aeruginosa poate crește încet într-un mediu anaerob la aproximativ 42 de grade C.

în Afară de mass-media menționate mai sus, Pseudomonas aeruginosa poate fi, de asemenea, cultivate în MacConkey agar (o cultură bacteriană mediu obicei folosit pentru a crește lactoza fermentează bacterii)., În timp ce bacteria nu poate folosi lactoza prezentă în acest mediu, ea supraviețuiește pe peptonă.

în agar MacConkey, Pseudomonas aeruginosa formează colonii plate și netede care au între 2 și 3 mm în diametru. În general, aceste colonii au margini regulate și au un aspect aligator al pielii atunci când sunt privite de sus.

Vezi mai multe despre cultura celulară.,osa colonii (albastru-verzui la culoare) sunt mijlocii și caracterizat printr-o creștere neregulată

· În Nutrient agar – Pseudomonas aeruginosa sunt asociate cu mai multe mirosuri variind de la un dulce miros pământul

colorație Gram

Cultivarea bacteriilor în cultură este important prin faptul că permite cercetătorilor să analizeze și să studieze diferite caracteristici (miros, textura și forma de colonii, culoarea coloniei, etc.) ale organismului.,

utilizarea tehnicii de colorare Gram face posibil ca cercetătorii să identifice nu numai caracteristicile morfologice ale celulelor bacteriene, ci și să le diferențieze pe baza componentelor peretelui celular.

Cerințe pentru colorația Gram include:

Sample – Pseudomonas aeruginosa cultivate în cultură pot fi folosite.,

• lame de Sticlă
• colorație Gram reactivi
• buclă de Sârmă
• Apa
• Arzător

Proceduri

· Dacă proba este obținută dintr-o placă de cultură, apoi, este necesar să se adauge o picătură de apă pe lamă de sticlă înainte de aseptic, adăugând o cantitate mică de bacterii.,la sută câștig din el alcool) pe diapozitiv și apoi se clătește cu apă

· Inundații slide cu Safranin (counterstain) și apoi se clătește cu apă

· Adăugați o picătură de ulei de imersie pe diapozitiv și se observă la microscop

* Pregătirea mai multe slide-uri (aproximativ 3 slide-uri) este întotdeauna recomandat

Vezi mai multe pe Mobil colorare.,

Observație

atunci Când sunt privite la microscop, Pseudomonas aeruginosa va apărea ca roșu/roz tije. Acest lucru indică faptul că sunt bacterii Gram-negative, având în vedere că nu sunt în măsură să rețină pata primară (cristal violet).

Sub mărire mare, studiile au arătat Pseudomonas aeruginosa la gama de la 0,5 la 0,8 um în diametru și 1,5 la 3,0 um în lungime (tija-cum ar fi bacterii)., Ele sunt, de asemenea, caracterizate printr-un singur flagel polar utilizat pentru motilitate.

pentru unele dintre tulpini, studiile au evidențiat prezența a două până la trei flageluri polare utilizate pentru mișcare. În plus față de flagelă, Pseudomonas aeruginosa posedă, de asemenea, pili pe suprafața lor, care sunt utilizate pentru adeziune și o formă de motilitate cunoscută sub numele de motilitate spasmodică.

Citeste mai multe despre Gram pozitive și Gram negative.,

Infecție

așa Cum am menționat, Pseudomonas aeruginosa este responsabil pentru diverse infecții dobândite în spital.

Potrivit unui raport publicat de Centrul European pentru Prevenirea și Controlul Bolilor, în 2012, aproximativ 9% din toate asociate asistenței medicale infecții sunt cauzate de Pseudomonas aeruginosa, făcându-l cel de-al patrulea cel mai comun agent patogen responsabil de infecții în spitalele Europene.,

în cea mai mare parte, bacteria este un agent patogen oportunist al țesuturilor mucoasei. Cu toate acestea, au fost raportate infecții ale corneei (ochiului) și ale tractului urinar.

în funcție de pacient, infecțiile tractului respirator variază de la pneumonia nosocomială la infecțiile pulmonare la pacienții cu fibroză chistică.,

Nosocomial Infections

Essentially, nosocomial infections are hospital-acquired infections and thus occur post-admission.,

Unele dintre aceste infecții includ:

Arde rana infecții – În plus față de Staphylococcus aureus și Streptococcus pirogeni, Pseudomonas aeruginosa este una din principalele cauze ale infecțiilor invazive printre pacienții arși. Aici, locul rănirii (de la arsură) permite invazia succesivă a bacteriei.,

în afară de intrarea în organism prin pielea rănită, s-a demonstrat că bacteria intră ca urmare a leziunilor prin inhalare, crescând astfel riscul de infecții respiratorii.

Bacteriemie – Pseudomonas aeruginosa este, de asemenea, una dintre principalele cauze de bacteriemie nosocomială. Având în vedere că acest organism special sa dovedit a fi rezistent la diferite antimicrobiene, aceste infecții s-au dovedit a duce la o mortalitate mai mare în comparație cu unii dintre ceilalți agenți patogeni responsabili de bacteriemie.,

Spital și ventilator-associated pneumonia – Având în vedere faptul că tractul respirator oferă condiții favorabile pentru viață, bacteria este ușor de capabil de a provoca cronice și infecții acute în rândul pacienților cu fibroză chistică.

în plus, agentul patogen a fost, de asemenea, dovedit a fi una dintre principalele cauze ale pneumoniei asociate ventilatorului (VAP), în special în cazul creșterii duratei ventilației mecanice.,

Infecții ale Tractului Urinar

Pseudomonas aeruginosa a fost dovedit a fi deosebit de eficient la formarea de suprafață asociate biofilme. Pentru pacienții care utilizează catetere, s-a demonstrat că bacteria formează biofilm pe suprafața acestor catetere (catetere interioare) și, în cele din urmă, provoacă o infecție pe măsură ce proliferează.,

Pathogenesis and Virulence Factors of Pseudomonas aeruginosa

Pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa is made possible by several virulence factors that include:

Lipopolysaccharide – Lipopolysaccharide is one of the main components of the outer membrane of Pseudomonas aeruginosa., În plus față de lipidul A, un domeniu hidrofob, această componentă a membranei exterioare constă, de asemenea, din antigenul O (polizaharidă distală) care nu numai că determină serotipul organismului, ci și activează sistemul imunitar al gazdei.

în cele din Urmă, polizaharide rezultate în dysregulated inflamație care a fost asociată cu morbiditate și mortalitate.

Flagel – așa Cum am menționat, Pseudomonas aeruginosa conține un singur flagel polar utilizate pentru înot în medii umede., În plus față de motilitate, această structură sa dovedit, de asemenea, că joacă un rol important în atașarea la epiteliu, invazie, precum și formarea biofilmului.

Tip IV Pili – pili de Tip IV situat pe suprafața de Pseudomonas aeruginosa joacă un rol important în aderarea la diferite celule astfel promovând infecții. În plus față de adeziune, pili s-au dovedit, de asemenea, a fi implicate în motilitatea twitching care, la rândul său, promovează formarea de biofilme.,div>· Proteases – Pseudomonas aeruginosa produces a number of proteases including LasB and alkaline protease that destroy tissue

· Alginate – is one of the main components of mucoid exopolysaccharide capsule and plays an important role in cell adherence

Antibiotic Resistance

Following an infection, Pseudomonas aeruginosa has been shown to be resistant to a variety of antimicrobials.,

Există mai multe moduri de rezistență care includ:

Intrinsecă rezistență la antibiotice – în Esență, intrinseci rezistența la antibiotice se referă la capacitatea înnăscută de bacterii pentru a evita impactul de antibiotice. Acest lucru poate fi realizat prin diferite caracteristici structurale și funcționale.,

Unele dintre mecanismele prin care Pseudomonas aeruginosa este în măsură să diminueze eficacitatea diverse antibiotice (intrinsec) include:

Permeabilitate a membranei exterioare – În Pseudomonas aeruginosa, membrana exterioară este un bistrat asimetric, care este format din fosfolipide și LPS (Lipopolysaccharides). Se compune, de asemenea, din porine care sunt responsabile pentru canalele proteice beta-baril.,

compoziția acestei membrane o face foarte restrictivă și este responsabilă pentru limitarea penetrării antibioticelor. Cu toate acestea, membrana nu împiedică complet această penetrare. Mai degrabă, absorbția lentă a acestor molecule contribuie la rezistența intrinsecă.

Eflux sisteme – în Afară de limitarea membrana exterioara, Pseudomonas aeruginosa este, de asemenea, capabil de a pompa compuși toxici., În special, studiile au arătat că proteinele asociate cu familia de rezistență-nodulare-diviziune (RND) sunt implicate în mare măsură în această activitate în această bacterie.

Aici, proteine alcătuiesc membrana citoplasmatică transportatorilor și exterior membrana porin canal proteine implicate în expulzarea compuși toxici din celula. În cazurile în care aceste pompe sunt supraexprimate, bacteria dezvoltă treptat rezistență la o varietate de medicamente.,

Antibiotic-inactivarea enzimelor – Unul dintre ceilalți factori care contribuie la rezistența la antibiotice este capacitatea bacteriei de a produce enzime capabile de a rupe în jos și modificarea antibiotice.

în particular, s-a demonstrat că Pseudomonas aeruginosa produce enzime precum enzima hidrolitică β-lactamază, care rupe legătura amidică a anumitor antibiotice. În acest fel, medicamentul este ineficient împotriva agentului patogen.

de asemenea: cum antibioticele ucid bacteriile?,

Dobândit Rezistență la Antibiotice

Dobândit rezistență la antibiotice este al doilea mecanism prin care Pseudomonas aeruginosa au dezvoltat rezistență la antibiotice.

Acest lucru este realizat prin:

Mutatii schimba – Mutatii schimbare este deosebit de benefic pentru agent patogen ca modificarea antibiotic obiective le permite să se sustragă de la acțiunile preconizate de droguri., Aceasta poate implica supraexprimarea pompelor de eflux și, prin urmare, capacitatea bacteriei de a elimina substanțele toxice din celulă.

Dobândit gene de rezistență – Bacterii au dovedit a fi capabil de a dobândi genelor, prin transfer orizontal. În cazul diferitelor tulpini de P. aeruginosa, dobândirea genelor de rezistență permite bacteriei să dezvolte rezistență la diferite antibiotice. Acest transfer poate avea loc prin conjugare, transducție sau transformare.,

Adaptive Rezistența la Antibiotice

ultimul mecanism de rezistență față de antibiotice este prin adaptive rezistența la antibiotice. În general, acest lucru se realizează prin formarea unui biofilm. Un biofilm se referă la aderența sau gruparea microorganismelor pe o suprafață dată.

în gazdă, biofilmul format de Pseudomonas aeruginosa este apoi acoperit de o matrice., În comparație cu alte celule patogene, aceste celule tind să fie mai puțin sensibile la agenții antimicrobieni.

Testarea Susceptibilității Antimicrobiene

așa Cum am menționat, Pseudomonas aeruginosa a fost dovedit a fi rezistente la o serie de antibiotice. Acest lucru se datorează unui număr de factori de virulență asociați organismului. Din acest motiv, testarea sensibilității antimicrobiene este un test important pentru a determina cel mai eficient tratament pentru tratarea infecțiilor cauzate de bacterie.,

în esență, testarea sensibilității antimicrobiene implică plasarea unui microorganism în contact cu antibioticele pentru a studia dacă organismul va crește sau nu în prezența antibioticelor utilizate.

Aici, agar Mueller-Hinton cu ajutorul discului de difuzie poate fi folosit pentru a testa având în vedere că tehnica este aplicabilă pentru o gamă largă de non pretențios bacterii cu schimbare de eroare.,/div>· amestecul este apoi încălzit pentru aproximativ 1 minut, cu frecvente agitație în scopul de a se asigura că conținutul se amestecă în mod corespunzător

· agar este autoclavate timp de 15 minute la 121 de grade C și apoi se lasă să se răcească până la 45 de grade C,

· agar este apoi turnat în cutii Petri la o adâncime de aproximativ 4mm

· plăcile se lasă să se solidifice la temperatura camerei și investigat pentru a se asigura că pH-ul rămâne 7.,3 +11 la 25 de grade C,

* după ce cercetătorul este gata pentru a testa sensibilitatea/susceptibilitatea agentului patogen bacteria este inoculat și antimicrobiene discuri plasate pe cultura (folosind forceps steril). Plăcile sunt apoi inversate și incubate la 37 de grade C pentru Între 16 și 18 ore.

* Antibiotic discuri conțin medicamentul testat.,me of the antibiotics used to test sensitivity/susceptibility of Pseudomonas aeruginosa include:

• Ticarcillin
• Aztreonam
• Ciprofloxacin
• Kanamycin
• Cefepime

Water Treatment

While Pseudomonas aeruginosa is ubiquitous in nature, it’s commonly found in moist environments., Din acest motiv, se găsește și în diverse corpuri de apă, inclusiv lacuri și râuri etc. Pentru a preveni posibilele infecții, este necesară tratarea apei.

testarea sensibilității antimicrobiene este utilizată pentru a determina cel mai eficient dezinfectant de apă. Aici, acest test ia în considerare și impactul pe care dezinfectanții testați îl pot avea asupra sănătății celor care folosesc apa.,

pe Baza unor studii anterioare, Pseudomonas aeruginosa a fost dovedit a fi sensibile la mai multe dezinfectante inclusiv ozon, iod, cloramina, clor. Din acest motiv, ele sunt utilizate în mod obișnuit pentru tratarea apei în multe națiuni dezvoltate și în curs de dezvoltare.

deși dezinfecția UV (ultravioletă) s-a dovedit eficientă pentru o serie de alte microorganisme din apă, această formă de tratament s-a dovedit a fi mai puțin eficientă atunci când vine vorba de Pseudomonas aeruginosa., Ca urmare, opțiunile de tratare a apei menționate mai sus sunt adesea recomandate.,s syringae

Return to Pseudomonas main page

Return to learning about Proteobacteria

Return to Bacteria under a microscope main page

Return to more on Bacteria – Size, Shape and Arrangement

Return from Pseudomonas aeruginosa to MicroscopeMaster home

Barbara H., Iglewski. (1996). Pseudomonas. Microbiologie Medicală. Ediția a 4-a.

Benie CKD și colab. (2017). Prevalența și rezistența la antibiotice a

Pseudomonas aeruginosa izolat din carne de Bovine, pește proaspăt și pește afumat.

Kristina D Mena și Charles P Gerba. (2009). Evaluarea riscului de Pseudomonas aeruginosa în apă.

Patricia Ruiz-Garbajosa și Rafael Canton. (2017). Epidemiologia rezistenței la antibiotice în Pseudomonas aeruginosa. Implicații pentru terapia empirică și definitivă.,

Robert B. Fick, Jr. (1993). Pseudomonas Aeruginosa oportunistul.