teoria TLC
exemplu de Experiment tipic
sfaturi practice de laborator
Întrebări frecvente: pentru TLC, solventul de probă și solventul eluent trebuie să fie aceleași?
FAQ: Care este scopul unui solvent de probă în prepararea unei plăci TLC?
FAQ: Cum pot determina solventul meu de probă?
FAQ: în TLC, care este scopul utilizării solventului(solvenților) eluent (i)?
Întrebări frecvente: cum funcționează solventul(solvenții) eluent (i)?
FAQ: trebuie să folosesc doi solvenți pentru eluentul meu?
FAQ: ce solvent(e) alegeți pentru eluent dumneavoastră?,
FAQ: când pregătim un TLC, de ce ar trebui să alegem cel mai puțin solvent polar pentru a dizolva proba noastră?
FAQ: ce este un „raport diclormetan: hexan de 3: 1”?
FAQ: petele mele TLC sunt prea mari, adică prea aproape de Frontul solventului (sau prea mici, adică prea aproape de linia de bază). Ce fac acum?
Întrebări frecvente: cum înregistrați corect informațiile obținute de la un TLC?
FAQ: Care este solventul în curs de dezvoltare?în timpul cromatografiei, o fază mobilă (eluent) distribuie compușii prezenți într-un amestec pe o fază staționară (adsorbant).,cromatografia în strat subțire (TLC) este un tip de cromatografie, unde:
– faza mobilă este un solvent sau un amestec de solvenți (eluent),
– faza staționară este un adsorbant solid (de exemplu, silice sau alumină) acoperit pe un suport staționar, cum ar fi sticla sau plasticul (placa TLC).
în primul rând, placa TLC este pregătită. Solidul necunoscut este aplicat ca soluție prin dizolvarea acestuia într-un solvent. O anumită soluție este redactată într-o micropipetă, apoi aplicată adsorbantului lângă un capăt al plăcii TLC (linia de bază), permițând soluției să se desprindă pe adsorbant., Acest proces este denumit în general „spotting placa TLC”.
cromatograma este apoi dezvoltată prin plasarea plăcii TLC într-o cameră TLC (un pahar care conține faza mobilă, adică eluentul). Eluentul va deplasa adsorbantul prin acțiune capilară spre partea superioară a plăcii TLC (cunoscută sub numele de Frontul solventului), transportând proba cu ea. Acest proces este denumit în general „rularea plăcii TLC”.
în funcție de polaritatea relativă a eșantionului și a eluentului, eșantionul fie adsorbește în faza solidă, fie este eluat de faza mobilă (eluent)., Dacă eluentul este foarte polar în raport cu compusul dvs., acesta vă va dizolva eșantionul și eșantionul se va deplasa cu faza mobilă.în general, eluentul și eșantionul dvs. vor concura pentru un spațiu (un loc activ) pe adsorbantul (faza staționară) acoperit pe placa TLC. Compusul mai polar va câștiga această competiție și va adsorbi (adsorb) la adsorbant, în timp ce restul amestecului se va mișca.cu cât compusul este mai polar, cu atât va adera mai mult la adsorbant și cu cât distanța va fi mai mică față de linia de bază și cu atât valoarea Rf este mai mică.,
Eluent: solventul sau amestecul de solvenți (faza mobilă) utilizat pentru a dezvolta o cromatogramă TLC (placă).
eluție: procesul general de dezvoltare a unei plăci TLC.Rf (factor de retenție sau retardare): este o măsură a distanței parcurse de punctul compus în raport cu distanța parcursă de eluent. O valoare Rf dorită se situează între 0,3 și 0,7, deoarece este probabil ca alți compuși prezenți în amestec să fie vizibili pe placa TLC atunci când Rf se află în acest interval.,identificarea unui solid folosind cromatografie în strat subțire (TLC):
Mai întâi se prepară o placă TLC prin depistarea necunoscutului purificat și a unui eșantion autentic din fiecare compus posibil. Apoi se dezvoltă placa TLC. Pentru următoarea etapă (co-spotting), se alege un eșantion autentic al compusului cel mai apropiat în valoare Rf de necunoscut. TLC Co-spotting de o a doua placă permite identificarea preliminară a compusului. Trei pete sunt aplicate adsorbantului pe linia de bază a plăcii TLC: necunoscutul purificat, o probă autentică și un co-spot de probă necunoscută și autentică., Dacă placa TLC dezvoltată prezintă un singur rând de pete, se poate concluziona că necunoscutul a fost purificat și că necunoscutul este posibil același compus ca și eșantionul autentic. Cu toate acestea, deoarece valorile Rf sunt relative, nu absolute, unii compuși pot avea valori Rf foarte similare. Este necesară o măsurare a punctului de topire mixt pentru a identifica fără echivoc compusul necunoscut.evaluarea purității unui solid folosind cromatografia în strat subțire (TLC):
cromatografia în strat subțire (TLC) este o tehnică de separare care necesită foarte puține probe., Este utilizat în principal pentru a determina puritatea unui compus. Un solid pur va arăta un singur loc pe o placă TLC dezvoltată. În plus, identificarea tentativă a compusului necunoscut poate fi făcută prin analiza TLC.monitorizarea progresului unei reacții: progresul unei reacții poate fi monitorizat prin cromatografie în strat subțire. În diferite momente în timpul experimentului, o placă TLC este reperată de trei ori, apoi dezvoltată și privită sub lumină UV:
– la poziția 1 este o probă autentică a compusului de pornire.
– la poziția 2 este amestecul de reacție.,
– la poziția 3 este eșantionul autentic al produsului.
reacția a ajuns la finalizare, când placa TLC arată că nu mai rămâne materie primă în amestecul de reacție.Earl N. Meyer a dorit să determine puritatea acidului benzoic pe care l-a obținut din reciclarea chimică. El a decis să verifice puritatea prin analiză cromatografică folosind o placă TLC cu gel de silice. Pe placa TLC a marcat linia de bază cu un creion, indicând poziția de spotting cu o bifă., Earl a dizolvat aproximativ 20 mg de acid benzoic în 1 ml de metanol. Apoi a scufundat o micropipetă în soluție și a atins ușor placa TLC la bifa marcată pe linia de bază.apoi, Earl a pregătit camera de dezvoltare. A tăiat o hârtie de filtru pentru a alinia un pahar de 400 ml. Apoi a preparat eluentul: 10 ml dintr-un amestec de diclormetan și metanol într-un raport de 10 : 1. El a adăugat eluentul în pahar, rotindu-l pe hârtia de filtru pentru a-l uda complet., Earl a plasat placa TLC în camera de dezvoltare folosind pensete și a urmărit deplasarea eluentului pe placă prin acțiune capilară. Când eluentul era aproape de partea superioară a plăcii, a folosit pensete pentru a scoate placa din cameră, având grijă să marcheze imediat fața solventului cu un creion.
când placa TLC era uscată, Earl a văzut-o folosind o lungime de undă lungă, lumină ultravioletă. El a observat o singură pată albastră pe un fundal verde deschis. TLC-ul său a indicat că proba testată conținea o singură componentă și că acidul benzoic era pur., El a folosit un creion pentru a cerc la fața locului și o riglă pentru a face măsurătorile necesare pentru calcularea factorului de retenție.mai întâi, pregătiți o placă TLC: dizolvați o cantitate foarte mică din proba dvs. necunoscută într-un solvent volatil, apoi aplicați soluția, adică spotați adsorbantul la valoarea inițială.apoi, pregătiți camera TLC: tăiați porțiunea de hârtie de filtru care se ridică deasupra marginii paharului.
se prepară eluentul folosind un amestec de solvenți sugerați. Utilizați un total de ~10ml eluent într-un pahar de 250 mL.,când măsurați lichidele, citiți din partea inferioară a meniscului, adică uitați-vă la partea inferioară a curbei de la suprafața lichidului.rotiți eluentul pentru a uda hârtia de filtru și acoperiți paharul cu un capac. Aceasta va satura camera cu vapori de eluent și va preveni evaporarea eluentului.
dezvoltați placa TLC, adică lăsați eluentul să fitileze placa TLC până când este la aproximativ 1 cm de partea superioară a plăcii. Imediat după îndepărtarea plăcii TLC din pahar, trageți cu atenție o linie de-a lungul frontului solventului., Fii rapid, deoarece eluentul se va evapora în mai puțin de un minut.vizualizați placa dezvoltată folosind o lampă ultravioletă sau altă metodă de vizualizare:
– dacă se observă că punctul este prea aproape de linia de bază, eluentul dvs. nu este suficient de polar.
– dacă se observă că pata este prea aproape de partea frontală a solventului, eluentul dvs. este prea polar în raport cu compusul.cel mai bun Rf (factor de retenție sau retardare) se situează între 0,3 și 0,7.
Dacă doriți ca RF-ul locului TLC să fie mai mic, adică.,, la fața locului să fie mai mici în jos pe placa, trebuie să scadă polaritatea eluent. Fie alegeți un alt eluent (solvent), fie ajustați raportul solventului prin creșterea procentului de solvent nepolar în raport cu solventul polar din eluent. Reversul este valabil pentru Rf de un loc pe care doriți să fie mai mare, adică, la fața locului să fie mai departe pe placa.
reveniți la început
Q: pentru TLC, solventul de probă și solventul eluent trebuie să fie aceleași?
nu. Uneori, proba de solvent și solvent eluent (E) sunt aceleași, dar acest lucru nu este necesar., Dacă vă întrebați de ce gândiți-vă la diferitele funcții pe care le joacă fiecare solvent în procesul TLC.
reveniți la început
Q: Care este scopul unui solvent de probă în prepararea unei plăci TLC?
înainte de a putea dezvolta placa TLC, trebuie să transferați o mostră pe ea. Cea mai simplă metodă de a face acest lucru necesită dizolvarea probei într-un solvent. Observarea plăcii TLC folosind un micropipet și așteptarea evaporării solventului va lăsa proba pe placa TLC.
reveniți la început
Q: Cum pot determina solventul meu de probă?,
Ca o regulă de degetul mare, proba de solvent trebuie să: 1) se dizolvă proba la rece, 2) au un punct de fierbere scăzut (deci se va evapora rapid) și 3) să fie la fel de non-polar posibil (de exemplu, diclormetan), pentru că dacă un eșantion solvent ar trebui să rămână la un curs de dezvoltare placa, aceasta nu va schimba foarte mult polaritatea eluent(s) va fi folosind.
reveniți la început
Q: în TLC, care este scopul utilizării solventului(solvenților) eluent (i)?
Eluenții sunt faza mobilă în cromatografie, adică solventul din rezervorul de dezvoltare.,
în timpul dezvoltării cromatogramei, eluentul distribuie proba pe care ați transferat-o pe placa TLC peste adsorbantul de pe placă.
reveniți la început
Q: Cum acționează solventul(solvenții) eluent (i)?
proba compusă pe care ați observat-o pe faza staționară de pe placa TLC are două opțiuni: adsorbiți în faza solidă sau eluați de faza mobilă.dacă eluentul(ele) dvs. este (sunt) foarte polar (E) față de compusul dvs., acesta va dizolva proba și o va transporta în faza mobilă.,
În general, solventul(solvenții) eluent (numiți și faza mobilă) va concura cu proba dvs. pentru un spațiu pe adsorbantul (faza staționară) acoperit pe placa TLC. Compusul mai polar va câștiga această competiție și va adera (ad sorb) la adsorbant, în timp ce restul amestecului se va deplasa cu faza mobilă .
un eluent care este foarte polar în raport cu proba, va avea ca rezultat observarea spotului compus cu un Rf mai mare, adică mai aproape de Frontul solventului. Pe de altă parte, dacă eluenții sunt prea nepolari, spotul compus va fi observat cu un Rf mai mic, i.,e., mai aproape de linia de bază.
reveniți la început
Q: trebuie să folosesc doi solvenți pentru eluentul meu?
doi solvenți nu sunt întotdeauna necesari. Uneori, un solvent va fi potrivit. Cu toate acestea, doi solvenți vă permit să reglați polaritatea eluentă cu ușurință atunci când o placă TLC dezvoltată nu dă un rezultat adecvat.un eluent adecvat este unul care dă un factor de întârziere (Rf, numit și factor de retenție) aproape de 0,5 la dezvoltarea plăcii TLC.,
Este Rf prea mare sau prea mic, atunci puteți regla ușor polaritatea dacă eluent a fost preparat prin amestecarea a doi solvenți miscibili prin schimbarea relativă proprotions în eluent amestecul (de exemplu, de la 1:1 la 3:1).dacă a fost utilizat un singur solvent, va fi necesar să treceți la un solvent cu o polaritate diferită.
reveniți la început
Q: Ce solvent(solvenți) alegeți pentru eluentul dumneavoastră?
solventul(solvenții) eluent (I) utilizați este de obicei determinat experimental.,un eluent cu doi solvenți trebuie să conțină un solvent polar și un solvent nepolar; dar este important ca acești doi solvenți să fie miscibili (adică să se dizolve) unul cu celălalt. Un pariu bun este să începeți cu un raport de 1:1 și apoi să ajustați raportul în funcție de rezultatele obținute din cromatogramele dezvoltate.dacă utilizați un eluent cu un singur solvent, ar trebui să începeți cu un solvent care nu este foarte polar ca primă alegere.
reveniți la început
Q: atunci când pregătim un TLC, de ce ar trebui să alegem cel mai puțin solvent polar pentru a dizolva proba noastră?,
un solvent care nu este foarte polar va afecta eluentul(ele) într-o măsură mai mică dacă solventul nu se evaporă complet după detectarea TLC.Q: Ce este un „raport diclormetan : hexan de 3:1”?un raport vă spune ceva despre relația dintre componentele date într-un amestec. În acest caz, trei unități (de exemplu, 3 mL) de diclormetan trebuie amestecate cu o unitate (de exemplu, 1 mL) de hexan pentru a produce un total de 4 unități (aici: 4 mL) de amestec.
reveniți la început
Q: punctele mele tlc sunt prea mari, adică.,, prea aproape de Frontul solventului (sau prea scăzut, adică prea aproape de linia de bază). Ce fac acum?
când eșantionul dvs. produce o valoare Rf între 0,3 și 0,7, nu este necesar să ajustați eluentele.
cu toate acestea, dacă punctul dvs. este prea aproape fie de partea frontală a solventului, fie de linia de bază, trebuie să ajustați polaritatea sistemului dvs. de eluent.
punctul este prea aproape de linia de bază:
aceasta înseamnă că eluentul dvs. nu este, în raport cu eșantionul dvs., suficient de polar., Măriți polaritatea eluentului fie prin creșterea raportului dintre solventul polar al eluentului, fie prin trecerea la un solvent polar.
punctul este prea aproape de partea frontală a solventului:
eluentul dvs. este, în raport cu proba dvs., prea polar. Trebuie să micșorați polaritatea eluentului, fie prin creșterea raportului dintre solventul mai puțin polar al sistemului eluent, fie prin trecerea la un solvent mai puțin polar.
reveniți la început
Q: Cum înregistrați corect informațiile obținute de la un TLC?,utilizați un creion (nu un stilou) pentru a indica ușor fața solventului și pentru a contura petele pe care le vedeți la vizualizarea plăcii TLC dezvoltate fie cu lampa UV, fie cu pata de iod.după ce ați conturat placa TLC, calculați valoarea Rf pentru fiecare componentă și schițați o replică a TLC în notebook-ul dvs. de laborator.
înapoi la început
Lasă un răspuns